建立高效液相色谱法测定贵州不同产地大米中的维生素B1含量。大米样品粉碎后经0.1 mol/L盐酸溶液酸解、超声提取等前处理手段，采用C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以0.05 mol/L磷酸二氢钾∶甲醇=96∶4为流动相，流速1.0 ml/min，应用紫外检测器在280 nm波长下测定维生素B1含量。结果表明，维生素B1在0.2~1.0 μg/ml质量浓度范围内具有良好线性关系（R=0.999 4），最低检出限为2 ng/ml，在低、中、高三个水平下的加标回收率为95.8%~98.7%，相对标准偏差(RSD)为0.3%~1.4%。在5种贵州不同产地的大米中，维生素B1含量较高的是湄潭县“茅贡牌”大米，含量高达0.51 mg/（100 g）。该方法样品前处理简便、灵敏度高、适用范围广，可作为谷物中维生素B1含量的一种快速检测方法。