收集中国小麦各个主产区不同品种样品104份，研究采用国产便携式近红外谷物分析仪快速测定小麦蛋白质含量，用化学计量方法建立了小麦蛋白质含量的近红外分析模型，并对模型进行了预测准确性评价。在建模过程中，分别探讨光谱散射和数学导数处理等优化对定标模型的影响。结果表明：采用偏最小二乘法（PLS）建立模型，光谱预处理最佳条件为：Savitzky-Golay平滑、 Savitzky- Golay一阶导数、基线校正、均值中心化、主因子数为12。所建模型的定标标准偏差（SEC）和定标相关系数（R_C）分别为0.177和0.988；外部验证的标准偏差（SEP）和相关系数（R_P）分别为0.188和0.961。标准方法测定值与NIRS方法预测值之间的T检验结果为T=0.304（P＜0.05），表明两种测定方法测定值之间无显著性差异，说明定标模型具有很好的预测准确性，可应用于优质小麦收购中蛋白质含量的快速测定。